Objetivo

Investigar la seguridad, el perfil de episodios adversos y la eficacia de dosis únicas ascendentes de CTX310,   una formulación de CRISPR-Cas9 encapsulada en nanopartículas lipídicas (repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas–endonucleasa Cas9) para la edición génica in vivo del gen diana, ANGPTL3.

Diseño del estudio

Ensayo en fase 1A, multicéntrico, abierto de dosis únicas ascendentes de CTX310.

Población del estudio

Adultos de 18 a 75 años de edad con un diagnóstico de hipercolesterolemia no controlada, hipertrigliceridemia de moderada a grave o dislipidemia mixta. Los pacientes eran refractarios a las dosis máximas toleradas de las terapias hipolipemiantes, definidas según al menos uno de los siguientes criterios: triglicéridos séricos en ayunas (TG) >150 mg/dl (1.7 mmol/l), colesterol de lipoproteína de baja densidad (C-LDL) >100 mg/dl (2.6 mmol/l) o >70 mg/dl (1.8 mmol/l) en personas con enfermedad cardiovascular aterosclerótica, apolipoproteína B >100 mg/dl o colesterol no HDL >160 mg/dl (4.1 mmol/l). Los criterios de exclusión principales eran mujeres en edad fértil, personas con síndrome de quilomicronemia familiar con <5% de actividad de la lipoproteína lipasa o personas con una tasa de filtración glomerular estimada <60 ml/minuto/1.73 m² de superficie corporal.

Principales variables del estudio

·       Endpoints primarios de seguridad: Incidencia de episodios adversos conforme lo evaluado por los investigadores, incluyendo efectos tóxicos que limitan las dosis, que se clasificaron según los Criterios Terminológicos Comunes de Episodios Adversos (CTCAE), versión 5.0, del Instituto Nacional del Cáncer. Recibieron una puntuación de 1 a 5 según la cual cuanto mayor es el número, mayor la gravedad.  Los efectos tóxicos limitantes de la dosis se definieron como cualquiera de los siguientes: un aumento de los valores de aminotransferasas hepáticas a grado 3 o superior según CTCAE, con incrementos que persistieran durante más de 14 días después de la infusión; un aumento de los valores de bilirrubina o del índice internacional normalizado a grado 3 o superior según CTCAE; cualquier resultado anormal de laboratorio de grado 3 que persistiera durante 7 días o más; o cualquier resultado anormal de laboratorio de gravedad equivalente a grado 4 según CTCAE.

·       Endpoints secundarios de seguridad: Frecuencia y gravedad de los episodios adversos, incluidos los episodios adversos de especial interés (reacciones relacionadas con la infusión, hemorragias anormales, episodios trombóticos o hemorrágicos, aumentos de los valores de las aminotransferasas, reacciones alérgicas o localizadas o aparición de una nueva neoplasia).

·       Endpoints secundarios de eficacia: Cambio porcentual desde el inicio y a lo largo del tiempo en el C-LDL, los triglicéridos, la apolipoproteína B, el C-HDL y colesterol no HDL.

Métodos

Los participantes se inscribieron inicialmente en una de cuatro cohortes de dosis ascendentes de CTX310 (0.1 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg o 0.8 mg/kg).  Las dosis se calcularon según la cantidad total de ARN administrado y en función del peso corporal magro estimado. Se administró CTX310 como una única infusión intravenosa. El aumento de las dosis fue aprobado por el comité de revisión de seguridad después de que un mínimo de tres participantes recibiera tratamiento en cada nivel de dosis y completaran al menos 30 días de seguimiento. Posteriormente, se añadió una cohorte que debía recibir 0.7 mg/kg, y la cohorte que recibió 0.8 mg/kg se amplió después de que los primeros tres participantes completaran la infusión de CTX310, con el fin de definir mejor la relación dosis–respuesta.

Todos los participantes fueron observados durante al menos 24 horas después de la infusión, con evaluaciones de seguridad diarias durante los 3 días posteriores al tratamiento, controles semanales durante los primeros 30 días y visitas programadas posteriormente en los días 60, 90, 180, 270 y 360. Al momento de la publicación, todos los participantes habían completado al menos 60 días de seguimiento.

Resultados

De los 27 individuos evaluados, 15 cumplieron los requerimientos y recibieron CTX310 (3 en cada una de las dosis de 0.1 mg/kg, 0.3 mg/kg y 0.6 mg/kg; 2 a 0.7 mg/kg; y 4 a 0.8 mg/kg). La mediana de edad de la cohorte del estudio fue de 53 años (con un rango de 31 a 68 años); 6 participantes (40%) tenían enfermedad cardiovascular aterosclerótica y 6 (40%) tenían un diagnóstico clínico de hipercolesterolemia familiar, incluidos 5 con mutaciones genéticas patogénicas confirmadas. El C-LDL basal promedio (± desviación estándar) fue de 155±79 mg/dl, y la mediana del nivel de TG fue de 192 mg/dl (amplitud intercuartílica, 109 a 252 mg/dl).

La infusión en dosis única de CTX310 se asoció con pocos episodios adversos (Tabla 1).

Las concentraciones de ANGPTL3 se redujeron en un promedio del 32.7% con la dosis de 0.6 mg/kg, llegando al 79.7% con la dosis de 0.7 mg/kg y al 73.2% con la de 0.8 mg/kg. Los valores de C-LDL y triglicéridos se redujeron con las dosis de 0.6 mg/kg o superiores, hasta en un 50% y un 60%, respectivamente. Las reducciones de estos parámetros lipídicos se observaron dentro de las primeras dos semanas de tratamiento y se mantuvieron hasta al menos 60 días, lo cual corresponde al seguimiento más prolongado disponible en este análisis.

Tabla 1. Resultados claves de seguridad

* Una persona recibió 0.3 mg/kg de CTX310 y fue hospitalizado por una hernia de disco espinal 7 meses después del tratamiento, y una persona murió 179 días después de la administración de 0.1 mg/kg de CTX310

** Dos personas que recibieron 0.6 mg/kg de CTX310 y uno que recibió 0.8 mg/kg de CTX310

Conclusiones del autor

La edición de ANGPTL3 se asoció con pocos episodios adversos y originó reducciones desde el valor inicial en los valores de ANGPTL3.